在HPLC分析中，出現(xiàn)無峰、小峰或負(fù)峰是常見的問題。這些問題通常是由于實驗條件的不當(dāng)、樣品制備方式不當(dāng)、儀器使用問題、列柱相關(guān)問題等原因所引起的。針對此類問題，應(yīng)該優(yōu)先考慮解決以下幾點:

1. 檢查檢測器燈是否亮起。有時候，不能檢測到某些組分是因為檢測器未開啟或者沒有正確安裝。

2. 檢查泵和積分器之間的連接是否松散或斷線。如果連接不緊密可能會導(dǎo)致流量變小或者樣品流動不均勻，進(jìn)而導(dǎo)致無峰、小峰等問題。

3. 檢查泵是否打開，流向是否正確。通常，泵應(yīng)該流向色譜柱而不是廢液。如果泵流向錯誤，可能會導(dǎo)致無法檢測到目標(biāo)物質(zhì)，同時也會導(dǎo)致其他各種問題。

4. 檢查樣品是否正確。顯然，如果樣品瓶裝錯了樣品或者樣品已經(jīng)變質(zhì)，可能會導(dǎo)致超出預(yù)期的結(jié)果。需要仔細(xì)檢查樣品標(biāo)簽和檢查樣品是否遇到了外界污染。

5. 檢查溶劑和流動相的組成是否合適。當(dāng)溶劑和流動相的組成差異很大時，會導(dǎo)致小峰或無峰；當(dāng)流動相比樣品組分對設(shè)定的UV波長更具吸收性時，則會誘發(fā)負(fù)峰，這些情況應(yīng)該引起充分的注意。

總之，在HPLC分析中出現(xiàn)問題時，請先仔細(xì)檢查以上幾點。如果這些問題都不是原因，那么有可能是某個實驗條件可以被進(jìn)一步優(yōu)化、樣品制備方式可改善，或者是需要手動調(diào)整柱溫等操作。解決這些問題需要一定的經(jīng)驗和技巧，同時具體的解決方案也需要根據(jù)具體的實驗情況進(jìn)行分析處理。